优秀啦小编带来了hplc品牌 请问一下 高效液相色谱仪(HPLC)的品牌都有哪些 有没...,希望能对大家有所帮助,一起来看看吧!
网络资料:自20世纪70年代以来,中国已有多个研究部门和工厂开发和生产稿扒渣高液相色谱仪。 LC已进入中国许多科学领域的实用阶段,特别是对热稳定性差或蒸气压低的样品组分进行分析,显示出LC的优越性。
近年来,高液相色谱仪在油脂分析方面取得了突破,特别是在石油中测定多环芳烃、重烃中。以己烷、二氯甲烷为流动相,苟爱仙采用多维高效液相色谱技术和适当的梯度洗脱条件,实现了残留烃基的良好分离和检测。吕振波等还使用HPLC分离和分析润滑基础油的化学组成。使用氰基柱和二氧化硅此高柱双柱的组合。正己烷用作流动相,折射率检测器用于检测不同的来源。和蒸馏范围内的基础油烃的家族组成。
高效液相色谱仪用途
过去,高效液相色谱仪在石油化学工业中,农药、环保,薄层色谱(TLC)和气相色谱(OC)常用于含量测定,而液相色谱(LC)仅用于测定标准样品。并研究分离的可能性。
高效液相色谱在生命科学研究工作中,最大的问题是基因的解密。从基因组DNA序列,基因的表达时间无法回答、表达量、蛋白质、的翻译后加工和修饰及其亚细胞分布。这些问题在基因组中无法解决,预计会在Proteome研究中找到答案。在研究的细胞中有30,000到50,000种具有不同功能的蛋白质。目前,蛋白质组学研究中使用的双向电泳方法只能区分2000~3000个蛋白质点。可以通过使用具有尺寸排阻色谱的二维HPLC高效液相色谱进行预分离来尝试现代蛋白质组分析。高效液相色谱和双向电泳将成为蛋白质组学的重要分离工具。因此,高效液相色谱将为揭示生命的奥秘做出更大的贡献。
高效液相色谱价格和厂家哪家好?
对于高效液相色谱,如果你有足够资金,可以选择德国奥普斯、日本的岛津、美国安捷伦、赛默飞和Waters,奥普斯、比较低,市场使用性能良好,赛默飞和岛津价格适中。而且很耐用,一般保养得很好,除了消耗的配件更换之外,仪器用个十几二十年是很键悄常见的事情。一般工厂用岛津比较多。
安捷伦价格高一点,但是工作站认证做的比较好。就是说不能破解,不能在色谱图和时间上作假。研发企业用的比较多。
Waters国家研究机构用的比较多,不好多做评价。
这些仪器如果购*应该都会有培训。一次是工程师上门安装的时候教授实验员的简单操作,另一次免费的培训是赠送的比较全面的培训,时间大概两三天的样子。
如果你在国内购*,大连精英、北分公司瑞利、上海天美、上海五峰、、南京科杰等国内品牌都非常好,因为很多人在进口仪器方面比国内更好。有些偏见,其实现在国内生产的仪器在市场上仅占10%左右。这就有个人根据需求选择了。没有最好的只有最合适的。希望能给大家带有一定参考价值。
色谱仪器分为气相色谱和液相色谱,还有气相色谱质谱联用仪等;
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那么,高效液相色谱仪(HPLC,HighPerformanceLiquidChromatography)如何选型?
高效液相色谱仪的选型,归结起来就是2个问题:如何确定高效液相色谱仪的配置?如何选择高效液相色谱仪的品牌?
今天我们就来谈谈第一问题,如何确定高效液相色谱仪的配置?
高效液相色谱仪可以分为5大部分:高压输液泵单元、进样器单元、分离单元、检测器单元、色谱数据处理单元,下面我们来逐一分析,谈谈高效液相色谱仪的选型细则。
1、高压输液泵单元的配置选型:
高效液相色谱仪的高压输液方式分为等度方式、梯度方式两大类别。
等度方式:在色谱分析过程中,流动相中各个组分的比例不随时间发生变化,例如某次分析过程中流动相中甲醇与水的比例是50:50一直保持不变,那么这种就叫做等度方式。
梯度方式:在色谱分析过程中,流动相中各个组分的比例随时间发生发生变化,例如某次分析过程中,随着时间的推移,流动相中其中一种(或几种)溶剂比例逐渐增大、另一种或几种溶剂的比例逐渐减少,最终那么这种输液方式就叫做梯度方式。
相应以上2种流动相输液方式,有等度泵和梯度泵这两种配置方式。
等度泵:一般采用单泵来作为高压输液泵单元,这是一种最简单最经济的配置方式。
梯度泵:又分为高压梯度、低压梯度。
高压梯度:常用的是二元高压梯度泵,也有三穗扰元高压梯度泵;我们通常所说的双泵,就是指“二元高压梯度泵”。有几元高压,则必须有几台泵;高压梯度泵单元,除了几台高压泵之外,还需要有配套的流动相混合装置(通常采用混合器);由于是高压混合的梯度方式,所以通常不太会产生气泡,脱气机通常可以不用配备。
低压梯度:与高压梯度“有几元高压就用几台泵”所不同的是,低压梯度只需要一台高压泵,但是在高压泵的前端,需要加上比例阀(有的公司称为低压梯度单元),通过比例阀来调节几种不同流动相进入高压泵的比例,从而实现梯度淋洗。因为低压下各种不同溶剂混合时可能产生吸热或放热,所以对于低压梯度泵单元来说,流动相脱气机与混合器一样,都是必不可少的。
高效液相色谱仪(HPLC)的高压输液哗腊泵单元的选型,主要是根据所检测项目方法的所需来定,方法中流动相输液是等度方式,那么等度泵(单泵)即可满足需求;如果方法中规定需要用到梯度淋洗输液方式,那么就需要选择梯度泵了。
在一些有HPLC分析方法开发任务的单位,为了满足将来可能的方法开发需要,即便暂时不需要梯度泵,也往往会配备梯度泵以利拓展方法。
2、进样器单元的配置选型
高效液相色谱仪(HPLC)的进样器单元,有2种配置可供选择:手动进样器、自动进样器。
手动进样器:无论是国产还是进口大牌,例如沃特世(Waters)、岛津(Shimadzu)、安捷伦(Agilent),世界上绝大多数公司均采用美国Rheodyne公司生产的六通进样阀作为高效液相色谱仪的手动进样阀。
自动进样器:自动进样器的最大优点就是,能极大的提高设备使用效率、减少人力成本。例如一个公司的HPLC使用部门,可以在下午下班之前,把未做完的50个样品都放进自动进样器内,然后设定分析程序、仪器清洗程序、关机程序,然后所有的人都可以下班,无需派人值守,第二天早上打印图谱、上报数据即可。
3、分离单元(高效液相色谱柱)
色谱柱是高效液相色谱仪的核心部件。
色谱法最核心的机制就是把样品中各个组分进行有效分离,而实现分离靠的就是色谱柱。
色谱柱选择时需要考虑四大参数:固定相类型(填料种类)、柱长、柱内径、填料粒度。
固定相类型:目前主要有硅胶基质的ODS(碳十八)、氨基、氰基、苯基、硅胶等色谱柱,以及高分子聚合物的固定相填料。目前ODS(碳十八)应用最为广泛,高效液相色谱法大约有80%分离采用的就是ODS(碳十八)填料。
柱长:色谱柱的长度越长,分离效果越好,但是背压也就越大、柱子价格就会越贵。目前柱长应用较多的是375px、500px、625px这三个长度,尤其以625px最多。
柱内径:其它几个柱参数不变的情况下,高效液相色谱柱的内径越小,分离度越好(分离度越高),但是柱负载量越小。常用柱内径是3.9mm、4.6mm、6.0mm,尤其以4.6mm为最常用。
填料粒径:根据色谱法的速率理论,填料粒径越小,分离效果越好;但是填料粒度越小,在同样的流动相输送流速下,对于高效色谱仪高压泵的背压也就越大,对于高压泵的加压能力、密封性能也就要求越高。高效液相色谱仪一般采用3微米、5微米或10微米的填料粒径,而3微米以下粒径的填料,通常应用于超高效液相色谱仪。高效液相色谱法应用最多的是5微米粒径的填料。
分离单元还有另外两个问题需要掂量:是否需要配预柱(保护柱)、是否需要配柱温箱。
预柱(保护柱):预柱(保护柱)的存在,会加大色谱死体积,会降低柱效,所以除非样品特别脏、或有特别多的高分子物质会堵塞分析柱,否则尽量不用预柱(保护柱)。
柱温箱:因为高效液相色谱法对于温度的些微波动并不特别敏感,除了一些对于柱温稳定性要求特别高的分离,高效液相色谱法很多情况下并不需要配置柱温箱。当然,如果采购预算足够多,安装柱温箱确实能有更好的色谱出峰时间重复性。
4、检测器单元的配置选型
高效液相色谱仪的检测器有很多种,最常见的是紫外检测器,还有示差检测器、荧光检测器、二极管阵列检测器、蒸发光散射检测器等等。
紫外检测器:是一种选择性检测器,几乎是所有HPLC检测器里面价格最便宜、应用最广泛的一种检测器,适合于测定有紫外吸收的物质(带苯环、杂环、双键叁键的物质)。紫外检测器的特点是灵敏度很高、适用性很广泛。
示差检测器:是一种通用型检测器,但是它的灵敏度低于紫外检测器,而且它对于流速比较敏感。示差检测器主要用来对一些没有紫外吸收的物质进行检测,例如糖类、高分子聚合物等等。
荧光检测器:仅仅适合于在紫外光照射下能发射荧光的物质,例如维生素A、维生素D、黄曲霉毒素等检测。高效液相色谱仪的荧光检测器的特点是灵敏度高、但适用范围较窄。
二极管阵列检测器:是紫外检测器的一个变种,二极管阵列检测器的特点是灵敏度较紫外检测器低、但是能做三维图谱,特别适合于医药研发类的应用。
蒸发光散射检测器:蒸发光散射检测器是一种新型的通用型检测器,未来的趋势是可以替代示差检测器等来检测无紫外吸收的物质,但是目前价格非常昂贵。
5、色谱数据处理单元
高效液相色谱仪的色谱数据处理单元,有数据处理机和色谱工作站两种,随着电脑的普及与应用,色谱数据处理机已经渐渐被淘汰,目前以色谱工作站为主流。
色谱工作站又分为可否反控两大类。
可反控工作站:不但能记录与处理色谱数据,而且可以反控高效液相色谱仪的各个组成单元。因为一些控制指令接口与数据传输的技术性问题,可反控工作站一般是各大仪器厂商自行研发与设计的,互相之间不能通用。
不可反控工作站:仅能记录与处理色谱数据,不可反控高效液相色谱仪。不可反控工作站通常是外挂式的,包含硬件和软件两大部分,硬件部分主要是一个A/D转换器,将高效液相色谱仪传输来的模拟信号转换成数字信号,再输进计算机;软件部分主要功能就是把硬件传输来的数字信号转换成图谱并进行积分计算等操作。
不可反控工作站的优点是通用性强,但是不可反控仪器、不便进行自动化操作。
二极管阵列检测器必须要用特殊的三维色谱软件。
综上所述,搞清楚了高效液相色谱仪的高压输液泵单元、进样器单元、分离单元、检测器单元、色谱数据处理单元的选型考量细则,那么我们才可以在尽量节约经费的情况下,选到我们所需要的仪器配置了。
这个东西没有什么性价比高,重点是看你要用来干什么。
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高效与自动化已经是现在实验检测仪器的潮流,二手高效液相色谱仪便可满足这样的需求与期望。您对高效液相有一个系统的了解吗,或许有部分人还不散清磨太清楚,那么,现在京科瑞达二手仪器为您整理了关于 二手高效液相色谱仪知识 汇总文章,希望对您有所帮助。
高效液相色谱仪主要由色谱泵及控制器、进样器、色谱柱、检测器和数据处理及控制五大部分组成,分离原理是一个物理过程,流动相携带着待分析化合物和其他一些共存物质流过色谱柱,利用不同物质在固定相上的保留时间不同,从而出峰时间不同而达到分离,利用保留时间定性,峰高或者峰面积定量,在将分离后的各个成分依次通过一紫外检测器时就可检测出各化合物的浓度来。
二手高效液相色谱仪特点:“三高一广一快”
1、高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,应对载液加高压。
2、高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到zui佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
3、高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。
4、应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
5、分析速度快、载液流速快:较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30 min,有些样品甚至在5min内即可完成,一般小于1h。此外HPLC还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点。
高效液相色谱仪的分离原理
根据分离原理的不同,高效液相色谱法可分为以下几种主要类型:液-液分配色谱法(LLC)﹑化学健合相色谱法﹑液-固吸附色谱法﹑离子交换色谱法﹑空间排阻色谱法等。
1、液-液分配色谱法(LLC)是基于样品组分中溶质在固定相和流动相之间的相对溶解度的不同而使组分在两相之间分配系数不同,进而分离的过程。
2、化学健合相色谱法是把固定液的有机基团通过化学反应键合在担体的表面上,从而克服固定液流失的正缺现象,以达到分离的目的。
3、液-固吸附色谱法是根据样品中各组分吸附作用的不同而实现彼此分离的过程。
4、离子交换色谱法是利用离子交换原理与液相色谱技术结合的方法来测定溶液中阳离子和阴离子的。
5、空间排阻色谱法是把具有化学惰性的多孔物质作为固定相,使样品组分受固定相孔径大小的影响,将不同体积的分子进行分离的过程。
二手高效液相色谱仪应用领域
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种冲斗类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。
与试样预处理技术相配合,HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展,有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。
HPLC成为解决生化分析问题zui有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。
二手高效液相色谱在食品分析中的应用
在食品生产加工过程中,往往还会添加防腐剂﹑色素﹑甜味剂﹑保鲜剂等化学物质。它们的含量过高也将引起人类的健康问题。此外,由于我们所处环境的日益恶化,也会使食品沾染有害的微量元素来危害我们的身体健康。因此,高效液相色谱在食品分析中起到重大作用。
1、在食品中调味品的分析
高效液相色谱法也可以被用于食物调味品的分离分析。如J.D.BARANOWSKI报导了利用高效液相色谱法分离生姜辣味成分的方法。又如Bbathnanathic M和BuckleH.A报导了使用高效液相色谱法测定胡椒中胡椒碱含量的方法。
2、食品中有机酸的分离
食品中的有机酸是食品中酸味的主要来源,食品中有机酸的种类含量与构成对食品的味道有很大的影响。因此食品中有机酸的定性与定量分析不仅对食品营养研究意义重大,而且在食品生产过程的质量管理中也必不可少。HPLC应用于有机酸的测定时,要先将食品样品匀浆提取离心后,样液经0.3um滤膜抽滤,以(NH4)2HPO4—H3PO4缓冲液(pH=2.7)为流动相,用高效液相色谱法在C18色谱柱上分离,在波长210nm处经紫外检测器检测,用峰高或峰面积表示的标准曲线测定有机酸的含量。
3、食品中添加剂的分析
食品添加剂不仅种类繁多,功能各异,而且分类没有统一标准。因此,对添加剂的测定就提出了更加艰巨的要求。食品添加剂的测定同其他分析一样,首先要将其从复杂的混合物中分离出来,分离后再针对待测物质的物理﹑化学性质的不同来选择适当的分析方法。高效液相色谱在食品添加剂中的应用,不仅可以提高食品的质量以及营养价值,而且可以改善食品给我们带来的感观性质。食品添加剂可以防止食品变质,提高保藏期限,给我们提供美味的口感。我们可以用高效液相色谱法对甜味剂中糖精钠的含量进行测定。制备糖精钠的标准储备液和糖精钠的标准使用液,将样品微热搅拌,并加入氨水(1+1)调试pH=7,以甲醇-乙酸铵溶液(0.02mol/L)(5+95)作为流动相制备色谱柱,取样品处理液和标准使用液各10uL,注入高效液相色谱仪进行分离,以标准溶液的保留时间为依据进行测定,以其峰面积求出样液中被测物质的含量。
4、食品中糖类的分离分析
淀粉是一种多糖,它广泛存在于植物的根﹑茎﹑叶﹑种子等组织中,是人类食物的重要组成部分,同时也是供给人体热量的主要来源。淀粉是由葡萄糖单位构成的聚合体,其水解产物为单糖。我们可以用高效液相色谱法对小麦淀粉的水解产物进行分析。
5、食品中维生素的分离分析
维生素是人和动物为维持正常的生理功能而需从食物中获得的一类微量有机物,在人体的生长代谢和发育过程中发挥着重要的作用。在测定脂溶性维生素时,通常要先用皂化法处理样品,用水洗去除类脂物,然后用有机溶剂提取脂溶性维生素,浓缩后溶于适当的溶剂后测定。
6、在其他食品分析中的应用
HLPC不仅仅是应用在以上领域,还可以广泛用于食品药品残量的检测,食品中违禁成分的检测以及食品中营养成分的分离与分析。彭锦峰建立了用高效液相色谱测定食用香菇中甲醛的方法。王帆等键立了用高效液相色谱检测保健食品中大豆异黄酮的方法。这些方法的研究和实验,使高效液相色谱在食品中的应用得以发展,为日后高效液相色谱在食品分离与分析中的广泛应用提供了依据。
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